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植物ELISA試劑盒技術(shù)可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
ELISA方法中有二個必要的試劑:
(1)固相的抗原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
(2)酶符號的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);
一般可將植物Elisa試劑盒分為以下幾種類型,首要需求根據(jù)自己的待檢物來判定試劑盒類型。
1)雙抗體夾心法:針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標(biāo)檢測抗體。適用于測定二價或二價以上的大分子抗原如血漿中的細(xì)胞因子,不適用于測定半抗原及小分子單價抗原。同理,也有雙抗原夾心法測抗體。
2)直接法:將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號的一抗,即可測定抗原總量。此法操作手續(xù)簡略,因無須運用二抗可防止交互反響。
3)間接法:間接法是檢測抗體常用的方法,其原理為運用酶符號的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)來檢測與固相抗原結(jié)合的待檢抗體。
4)競爭法:小分子抗原或半抗原因短少可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,能夠選用競爭法形式。當(dāng)抗原材猜中的攪擾物質(zhì)不易除掉,或不易得到滿足的純化抗原時,可用此法檢測特異性抗體。